پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 43 |
| تعداد شماره‌ها | 1,705 |
| تعداد مقالات | 13,970 |
| تعداد مشاهده مقاله | 33,518,137 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 13,278,550 |
اثر شرایط محیطی بر تغییر شکل سودوموناس آئروجینوزا و ارتباط آن با مقاومت آنتی بیوتیکی در بیماران دچار سوختگی | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| زیست شناسی میکروبی | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| مقاله 4، دوره 4، شماره 15، آذر 1394، صفحه 21-28 اصل مقاله (475.99 K) | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| نوع مقاله: پژوهشی- فارسی | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| نویسندگان | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| محسن موقوفه ئی1؛ حسین فاضلی2؛ فرخنده پورسینا3؛ بهرام نصر اصفهانی4؛ شراره مقیم4؛ حمید واعظ5؛ شیما هادی فر1؛ منصور صدیقی1؛ حاجیه قاسمیان صفایی* 6 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 1کارشناس ارشد میکروبشناسی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 2دانشیار باکتریشناسی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3استادیار باکتریشناسی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 4دانشیار میکروبشناسی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 5دکتری میکروبشناسی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 6استاد میکروبشناسی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، ایران | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| چکیده | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| مقدمه: سودوموناس آئروجیوزا یک باکتری گرم منفی هوازی و از عوامل مهم عفونتهای بیمارستانی است. این باکتری در استرسهای محیطی مانند کمبود مواد غذایی، تغییر اسیدیته، تغییر فشار اسمزی و آنتیبیوتیکها تغییر ریختشناسی داده و به شکل کوکوئید در میآید. در شکل کوکوئید به علت تغییر در پپتیدوگلیکان دیواره سلولی، لیپیدهای غشا و کاهش فعالیت متابولیک باکتری نسبت به آنتیبیوتیکها مقاوم میشود. با توجه به افزایش مرگ و میر در بیماران سوختگی و مسأله مهم مقاومت آنتیبیوتیکی در سودوموناس آئروجینوزا در این بیماران، برآن شدیم تا پژوهشی در مورد عوامل مؤثر بر تغییر شکل به کوکوئید که خود یک عامل مقاومت آنتیبیوتیکی است، انجام دهیم. مواد و روشها: در پژوهش حاضر، از نمونههای زخم بیماران سوختگی (8 نمونه که توسط متخصص عفونی از زخم بیماران گرفته شد) و سویه استاندارد 27853 استفاده شد. نمونهها توسط آزمونهای بیوشیمیایی و روش PCR با پرایمرهای 16SrDNA تایید شدند. سپس، نمونهها در استرسهای قحطی مواد غذایی و آنتیبیوتیک قرار گرفتند. شکل باکتریها هر روز توسط میکروسکوپ دیجیتال دی پی ایکس (شرکت المپیوس ژاپن) به مدت 60 روز بررسی شد. پس از القا فرم کوکوئید، زنده بودن باکتری توسط فلوسایتومتری تایید شد. نتایج: باکتری در شرایط آنتیبیوتیک از روز پنجم و در استرسهای دیگر از روز 10 شروع به تغییر شکل کرد. تغییر ابتدا به شکل باسیلهای کشیده، سپس به شکل U و در نهایت، به شکل کوکوئید دیده شد. در نمونه با استرس ایمیپنم و مروپنم نتیجه مشابه بود و غلظت القا کننده آنتیبیوتیک 2 میکروگرم در لیتر و غلظت کشندگی این دو آنتیبیوتیک بالاتر از 4 میکروگرم در لیتر بود. نتیجه سویه استاندارد برای ایمیپنم و مروپنم مشابه با سویههای بالینی بود. در نمونههای کلینیکی در استرس آمیکاسین غلظت القا کننده آنتیبیوتیک 4 میکروگرم بر لیتر و غلظت کشندگی بیشتر از 8 بود. در نمونه استاندارد در استرس آمیکاسین غلظت القا کننده آنتیبیوتیک 2 میکروگرم بر لیتر و غلظت کشندگی بیشتر از 4 بود. بحث و نتیجه گیری: تغییر شکل باکتری از باسیل به کوکوئید در نتیجه استرسهایی که در بدن بیمار به این باکتری وارد میشود، میتواند به مقاومت این باکتری به آنتیبیوتیک منجر شده و عواقب وخیمی را برای بیمار در بر داشته باشد. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| کلیدواژه‌ها | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| سودوموناس آئروجینوزا؛ فرم کوکوئید؛ بیماران سوختگی | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| اصل مقاله | |||||||||||||||||||||||||||||||||
|
مقدمه. سودوموناس آئروجینوزا [1]با تولید عوامل حدت مختلف میتواند موجب انواع بیماری شامل باکتریمی، اندوکاردیت، عفونت دستگاه ادرار، دستگاه تنفسی، سیستم عصبی مرکزی، گوش، چشم، استخوان، مفاصل و پوست شود (1). این باکتری به عنوان سومین عامل در عفونتهای بیمارستانی و نخستین عامل ایجاد عفونتهای بیمارستانی در بخشهای سوختگی بیمارستانها مطرح است (2 و 3). سپتی سمی ناشی از این باکتری به عنوان یک عارضه جدی ناشی از عفونتهای سوختگی مطرح بوده و خطر این عارضه متناسب با درجه سوختگی افزایش مییابد (4 و 5). این باکتری عامل اصلی مرگ و میر در بخش سوختگی بیمارستان است (6). امروزه شاهد این مسأله هستیم که با وجود اثرگذاری آنتیبیوتیکهای مورد استفاده در درمان این باکتری در شرایط آزمایشگاهی، همیشه نتیجه مطلوب و مشابه این شرایط روی بیمار حاصل نمیشود و این مسأله مربوط به شرایط فیزیولوژیک باکتری بوده و خود متأثر از شرایط محیطی است (7). توانایی این باکتری برای رشد در محیطهای با حداقل مواد غذایی و داشتن مقاومت طبیعی به عوامل ضدعفونی کننده وآنتیبیوتیکها باعث میشود که این باکتری از وسایل پزشکی و محیطهای مرطوب بیمارستانها جداسازی شود (8). در طی عفونت، سودوموناس آئروجینوزا باید در برابر تغییرات محیطی از جمله تغییر در دما، اسیدیته [2]، قدرت یونی، حد واسطهای فعال اکسیژن و آنتی بادی مقاومت کرده و زنده بماند (9). باکتری در اثر استرسهایی مانندکمبود موادغذایی، تغییراسیدیته، تغییر دما، کاهش اکسیژن، افزایش فشار اسمزی و آنتیبیوتیکها ابتدا به شکل U و سپس، به شکل کوکوئید در میآید. بنابراین، باکتری به شکلهای باسیلی، U شکل وکوکوئید دیده میشود (10 و 11). درطی تبدیل به شکل کوکوئید اندازه سلول کاهش مییابدکه نتیجه انقباض غشای سیتوپلاسمی وکاهش در حجم فضای پری پلاسمیک است، همچنین، DNA (دئوکسیریبونوکلئیکاسید [3]) فشردگی پیدا میکند (12 و 13). مطالعات مختلف نشان داده که مجاورت باکتری با غلظتهای زیر حداقل غلظت مهار کننده رشد [4] آنتیبیوتیکها بر چسبندگی، هیدروفوب سطحی سلول و تحرک باکتری اثر میگذارند (14 و 15). پژوهشها نشان میدهندکه وقتی باکتری از شکل باسیل به کوکوئید تغییر شکل میدهد مقاومت آنها نسبت به پراکسید هیدروژن، فشاربالای اسمزی، شوک حرارتی، مقاومت به آنتیبیوتیک، عوامل شیمیوتراپی و عوامل احیاکننده افزایش مییابد. این مقاومت میتواند به علت تغییرات در اتصالات متقاطع دیواره سلولی و یا کاهش فعالیتهای متابولیک باشد (10، 16- 18). در تبدیل شکل باسیل به شکل کوکوئید ژنهای متفاوتی دخالت دارند ازجمله ژن rpoS کهعاملهای سیگمای متفاوتی کد میکند و باعث زنده ماندن سودوموناس آئروجینوزا در شرایط استرس میشوند (19). ژن rpoS یک پروتئین به نام عامل سیگما (RpoS) را کد میکند که یک عامل عمومی رونویسی بوده و در تنظیم ژنهای درگیر در فاز ایستایی [5] دخالت دارد. این ژن دارای عملکردهای بسیار مهمی برای باکتری از جمله: کنترل ژنهای درگیر در تحمل فشار اسمزی، کمبود مواد غذایی و گرما، کنترل تولید اگزوتوکسین A، الاستاز، پیوسیانین، پروتئاز، آلژینات، تشکیل بیوفیلم و تغییر در پوشش سلولی و شکل است (1، 9 و 20). با توجه به افزایش مرگ و میر در بیماران سوختگی و مسأله مهم مقاومت آنتیبیوتیکی در سودوموناس آئروجینوزا در این بیماران برآن شدیم تا پژوهشی در مورد عوامل مؤثر بر تغییر شکل از باسیل به کوکوئید انجام دهیم. مواد و روشها. سویههای باکتری و شرایط کشت: در پژوهش حاضر، از ایزولههای سودوموناس آئروجینوزا به دست آمده از بیماران سوختگی بیمارستان امام موسی کاظم (ع) اصفهان و سویه استاندارد 27853 تهیه شده از انستیتو پاستور ایران استفاده شد. سویهها روی محیط سیتریمید آگار [6] کشت داده شد. پس از 24 ساعت انکوباسیون در دمای 37 درجه باکتریهای رشد یافته با رنگ آمیزی گرم و آزمایشهای بیوشمیایی مانند اکسیداز، اکسیداتیو فرمنتاتیو [7] و رشد در 42 درجه و با پرایمرهای 16SrDNAتایید شدند. آنتی بیوگرام: در پژوهش حاضر، از آنتیبیوتیکهای ایمیپنم، مروپنم و آمیکاسین استفاده شد. حداقل غلظت مهار کننده رشد [8] : میزان حداقل غلظت مهاری برای آنتیبیوتیکهای آمیکاسین و مروپنم به روش آزمون Eانجام شد. نمونهها باکدورتنیم مک فارلند تهیه و -+ محیط مولر هینتون آگار پخش شد. روی هر پلیت کشت داده شده یک نوار آزمون E قرار داده شد. نتایج پس از 24 ساعت انکوباسیون در 37 درجه ثبت شد. PCR و پرایمر مورد استفاده: روش واکنش PCR (زنجیره ای پلیمراز [9]) برای تایید سویههای جداسازی شده در سطح گونه به عنوان سودوموناس آئروجینوزا انجام شد. پرایمر مورد استفاده مربوط به قسمت بین ژنهای 16SrRNA و 23SrRNA بوده و توالی پرایمر به شکل زیر است (21): PA1 TCC AAA CAA TCG TCG AAA GC PA2 CCG AAA ATT CGC GCT TGA AC ناحیهای که این پرایمر تکثیر میکند شامل 181 جفت باز است. از سویه سودوموناس آئروجینوزا استاندارد 27853 به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. مخلوط واکنش PCR به شکل زیر است: 5/0 میکرولیتر از DNA استخراج شده به القای فرم کوکئید: کلونیهای تازه 24 ساعته (8 نمونه) از سودوموناس آئروجینوزا برداشته و شکل باسیل آنها بهوسیله رنگ آمیزی گرم تایید شد. سپس، درون محیط عصاره قلب مغز [15] تلقیح شد. پس از 24 ساعت انکوباسیون در 37 درجه سانتیگراد، در شرایط استرسهای مختلف شامل کمبود مواد غذایی و آنتیبیوتیک قرار داده شدند. به لولههای با استرس آنتیبیوتیکی غلظتهای مختلف ((MIC, 1/2 MIC and 2×MIC آنتیبیوتیکهای ایمیپنم، مروپنم و آمیکاسین اضافه شد. یک لوله بدون آنتیبیوتیک به عنوان کنترل قرار داده شد. نمونهها پس از 24 ساعت رشد، تا 60 روز نگهداری شد. هر روز ریختشناسی آنها با رنگ آمیزی گرم و با میکروسکوپ (دیجیتال دی پی ایکس شرکت المپیوس ژاپن [16]) با بزرگنمایی 1000 بررسی شد. زمانی که بیش از 90 درصد باکتریها به فرم کوکوئید تبدیل شدند زنده ماندن آنها بررسی شد. همچنین، با این میکروسکوپ اندازه شکل باسیل و کوکوئید نیز اندازهگیری شد. درصد شکلهای کوکوئید به شکل شمارش 100 باکتری در 3 میدان دید برای هر اسمیر اندازهگیری شد. زمانی که کوکوئیدها 95 درصد کل سلولهای باکتری را شامل شدند آزمایش قابلیت زنده بودن [17] انجام شد. یکپارچگی غشا و سنجش زنده بودن سلول: این کار با روش فلوسایتومتری و مطابق مراحل زیر انجام شد: 1- پس از تهیه سوسپانسیون باکتری، 3 مرتبه با فسفات بافر سالین [18] (5 میلی لیتر با اسیدیته 8) و سانتریفیوژ در دور 1000 به مدت 10 دقیقه شستشو شد. 2- سپس، به باکتریهای رسوب کرده 1 میکرولیتر رنگ پروپیدیوم یودید [19] اضافه و 30 دقیقه در تاریکی انکوبه شد. 3- سوسپانسیون سلولی با فلوسایتومتری (فاکس کالیبور شرکت بکتون دیکنسون [20]) با طول موج 488 نانومتر تحلیل شد. 4- با این دستگاه 150 تا 500 سلول در ثانیه شمارش شد. 5- دادهها بر اساس شمارش 10 هزار سلول بر طبق FSC، SSC و فلورسانس قرمز اندازهگیری شد. یک سوسپانسیون سلولی از باکتریهای با کشت تازه به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. از یک سوسپانسیون باکتریهای با کشت تازه به عنوان کنترل مثبت واز یک سوسپانسیون باکتری کشته شده با حرارت به عنوان کنترل منفی استفاده شد.
نتایج. در روز اول که باکتریها در شرایط استرس قرار داده شدند از آنها لام گرفته و با میکروسکوپ شکل آنها بررسی شد. کمابیش 100 درصد به شکل باسیل بودند (شکل 1: الف). سپس، هر روز شکل آنها بررسی شد و در نمونههای با استرس مواد غذایی در روز 10 و در نمونههای با استرس آنتیبیوتیک پس از 72 ساعت باسیلهای بسیار کشیده و شکلهای U و خمیده دیده شد. در روز 16 استرس غذایی باکتری به شکل کوکوئید دیده شد (شکل 1: ب). در روز 39 استرس غذایی و روز 8 استرس آنتیبیوتیک کمابیش همه نمونهها به شکل کوکوئید تبدیل شده بودند (شکل1: ج).
شکل 1- تصاویر میکروسکوپی از رنگ آمیزی گرم سودوموناس آئروجینوزا در مراحل مختلف شکلی. الف) شکل باسیل باکتری پس از 24 ساعت انکوباسیون ب) شکل باسیل، U شکل و باسیل کشیده ج) شکل کوکوئید باکتری پس از 8 روز در استرس آنتیبیوتیک
A
B
C
شکل 2- Light scatter of gated (A سلولهای سودوموناس آئروجینوزا B) نسبت جذب پروپیدیوم آیودید در نمونه کنترل مثبت سودوموناس آئروجینوزا که باکتریها کشته شده اند (جذب بالا در ناحیه M2)(Cنسبت جذب پروپیدیوم آیودید در نمونه کنترل منفی که باکتری به فرم باسیل و زنده است (جذب بالا در ناحیه M1). M1درصد سلولهای زنده و M2 درصد سلولهای مرده است.
شکل 3- میزان جذب متفاوت پروپیدیوم آیودید در 2 نمونه مختلف. در نمونه اول مدت زمان استرس کمتر بوده و در نتیجه تعداد سلولهای زنده بیشتر است(M1).در نمونه دوم مدت زمان استرس بیشتر بوده و در نتیجه تعداد سلولهای مرده بیشتر است (M2). در نمونه کنترل که به روش گرم رنگ آمیزی شده بود نشان داد که تمام باکتریها به شکل باسیل بودند. در نمونههای در استرس آنتیبیوتیک میزان غلظت آنتیبیوتیکی که موجب القای شکل کوکوئید یا از بین رفتن شکل کوکوئید شد به ترتیب زیر بود: در نمونه در استرس ایمیپنم و مروپنم نتیجه مشابه بود و غلظت القا کننده آنتیبیوتیک 2 میکروگرم در لیتر و غلظت کشندگی این دو آنتیبیوتیک بالاتر از 4 میکروگرم در لیتر بود. نتیجه سویه استاندارد برای ایمیپنم و مروپنم مشابه با سویههای بالینی بود. در نمونههای کلینیکی با استرس آمیکاسین غلظت القا کننده آنتیبیوتیک 4 میکروگرم بر لیتر و غلظت کشندگی بیشتر از 8 بود. در نمونه استاندارد با استرس آمیکاسین غلظت القا کننده آنتیبیوتیک 2 میکروگرم بر لیتر و غلظت کشندگی بیشتر از 4 بود. زنده بودن نمونهها در شکل کوکوئید با روش فلو سایتومتری تایید شد (شکل 2 و 3). بحث و نتیجهگیری. عفونت این باکتری در بیماران بستری به عنوان یک خطر جدی به شمار میرود بهطوری که در موارد سپتی سمی با سودوموناس آئروجینوزا با وجود درمان با آنتیبیوتیکها، در بیماران دچار سوختگی میزان مرگ و میر به 50 درصد میرسد (22). هدف از انجام این پژوهش، افزایش دانش درباره اثر عوامل محیطی روی القای تغییر شکل سودوموناس آئروجینوزا است. شکل هر باکتری بیشتر با پپتیدوگلیکان آن تعیین میشود که جزو اصلی دیواره سلولی است (23). برخی آنتیبیوتیکهای بتالاکتام مانند ایمیپنم که توانایی اتصال به پروتئینهای متصل شومنده به پنی سیلین را دارند موجب تغییر شکل باکتری میشوند (14). یکی از اصلیترین رفتارهای مشاهده شده در باکتریهای گرم منفی با شرایط استرس محیطی کاهش اندازه سلول و تغییر شکل باسیل به کوکوئید است (10). نتایج پژوهش حاضر نشان داد که هم کمبود مواد غذایی و هم آنتیبیوتیک موجب القای شکل کوکوئید در سودوموناس آئروجینوزا شدند. یکی از نتایج مهم پژوهش حاضر این بود که هر سه آنتیبیوتیک مورد استفاده در غلظتهای کمتر از حداقل غلظت مهاری موجب القای شکل کوکوئید شدند. در مطالعه سفالی [xxi] و همکاران در ایتالیا سویه سودوموناس آئروجینوزا از روز 9 شروع به تغییر شکل و تبدیل به شکل کوکوئید کرده است. در پژوهش حاضر سویههای با استرس مواد غذایی و دما از روز 16 و سویههای با استرس آنتیبیوتیک از روز 5 شروع به تغییر شکل و تبدیل به شکل کوکوئید کردند. علت این تفاوت میتواند اختلاف در ویژگیهای سویه مورد مطالعه، نوع و زمان استرس و نوع محیط کشت مورد استفاده باشد (24). در مطالعه فقری [xxii] و همکاران در ایران روی هلیکوباکتر پیلوری پس از 3 روز استرس آنتیبیوتیکی باکتری شروع به تبدیل به شکل کوکوئید کرد. در پژوهش حاضر این تغییر از روز 5 آغاز شد. علت این اختلاف میتواند میزان تحمل متفاوت باکتریها در برابر استرس، مقاومت ذاتی آنها به آنتیبیوتیک و نوع آنتیبیوتیک مورد استفاده باشد (25). بسنارد [xxiii] و همکاران با مطالعه روی کمپیلوباکتر ژژونی نشان دادند که این باکتری با استرس مواد غذایی در روز 14 شروع به تغییر شکل کرد (26). روشهای مختلفی برای سنجش زنده بودن شکل کوکوئید وجود دارد. در پژوهش حاضر از روش فلوسایتومتری به علت سریع بودن، آسان بودن و معتبر بودن استفاده شد (24). این باکتری به عنوان یک پاتوژن فرصت طلب در محیطهای بیمارستانی مطرح است، بنابراین، باید با برنامهای دقیق و هدفمند از بروز چنین سویههای مقاومی جلوگیری کرد(27). از آنجا که سودوموناس آئروجینوزا در زخم بیماران دچار سوختگی در معرض استرسهای مختلف از جمله کمبود مواد غذایی و آنتیبیوتیک قرار میگیرد و ممکن است به شکل کوکوئید تبدیل شود، دقت در تجویز غلظت آنتیبیوتیکها برای جلوگیری از القای شکل کوکوئید میتواند در جلوگیری از مقاومت آنتیبیوتیکی و درمان بیماران مفید باشد. مطالعه روی شکل کوکوئید از نظر بررسی مقاومت آنتیبیوتیکی، تعیین نوع و دوز آنتیبیوتیک برای پیشگیری از ایجاد شکل کوکوئید ضروری است. [1]- Pseudomonas aeruginosa [2]- pH [3]- Deoxyribonucleic acid [4]- sub Minimum Inhibitory Concentration [5]- Stationary state [6]- Cetrimide agar [7]- Oxidative-fermentative [8]- Minimum Inhibitory Concentration [9]- Polymerase chain reaction [10]- Deoxynucleotide triphosphates (dNTPs) [11]- DNA Ladder [12]- Fermentase [13]- Green viewer [14]- Gel documentation [15]- Brain-heart infusion [16]- Digital DP 72-BX 51, Olympus, Japan [17]- Viability [18]- Phosphate Buffer Saline [19]- Propidium Iodide(PI) [20]- FACSCalibur, Beckton Dickinson [xxi]- Cefali [xxii]- Faghri [xxiii]- Besnard | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| مراجع | |||||||||||||||||||||||||||||||||
|
(1) Iversen BG., Brantsaeter AB., Aavitsland P. Nationwide study of invasive Pseudomonas aeruginosa infection in Norway: importance of underlying disease. The Journal of infection 2008; 57 (2): 139- 46. (2) Bert F., Maubec E., Bruneau B., Berry P., Lambert- Zechovsky N. Multi- resistant Pseudomonas aeruginosa outbreak associated with contaminated tap water in a neurosurgery intensive care unit. Journal of Hospital Infection 1998; 39 (1): 53- 62. (3) Rastegar Lari AR., Alaghehbandan R., Akhlaghi L. Burn wound infections and antimicrobial resistance in tehran., iran: an increasing problem. Annals of burns and fire disasters 2005; 18 (2): 68- 73. (4) De Vos D., Lim A Jr., Pirnay JP., Struelens M., Vandenvelde C., Duinslaeger L., et al.. Direct detection and identification of Pseudomonas aeruginosa in clinical samples such as skin biopsy specimens and expectorations by multiplex PCR based on two outer membrane lipoprotein genes. oprI and oprL. Journal of clinical microbiology 1997; 35 (6): 1295- 9. (5) Pirnay J- P., De Vos D., Duinslaeger L., Reper P., Vandenvelde C., Cornelis P., et al. Quantitation of Pseudomonas aeruginosa in wound biopsy samples: from bacterial culture to rapid `real- time' polymerase chain reaction. Critical Care 2000; 4 (4): 255- 62. (6) Bahar MA., Jamali S., Samadikuchaksaraei A. Imipenem- resistant Pseudomonas aeruginosa strains carry metallo- beta- lactamase gene bla (VIM) in a level I Iranian burn hospital. Burns 2010; 36 (6): 826- 30. (7) Murakami K., Ono T., Viducic D., Kayama S., Mori M., Hirota K., et al. Role for rpoS gene of Pseudomonas aeruginosa in antibiotic tolerance. FEMS microbiology letters 2005; 242 (1): 161- 7. (8) Murakami K., Ono T., Viducic D., Kayama S., Mori M., Hirota K., et al. Role for rpoS gene of Pseudomonas aeruginosa in antibiotic tolerance. FEMS Microbiology Letters 2005; 242 (1): 161- 7. (9) Marlo Firme HK., Lee C., Song D. RpoS Contributes to Variations in the Survival Pattern of Pseudomonas aeruginosa in Response to Ciprofloxacin. Journal of Experimentall Microbiology and Immunology (JEMI) 2010; 14: 21- 7. (10) Cefalì E., Patanè S., Arena A., Saitta G., Guglielmino S., Cappello S., et al. Morphologic variations in bacteria under stress conditions: Near- field optical studies. Scanning 2002; 24 (6): 274- 83. (11) Oliver JD. The Viable but Nonculturable State in Bacteria. The Journal of Microbiology 2004; 1-8. (12) Sachidanandham R., Yew- Hoong Gin K., Laa Poh C. Monitoring of active but non- culturable bacterial cells by flow cytometry. Biotechnology and Bioengineering2005; 89 (1): 24- 31. (13) Elabed H., Bakhrouf A., Hamza R., Azaiez M., Gaddour K. Evidence of the adaptive response in Pseudomonas aeruginosa to 14 years of incubation in seawater. Annals of Microbiol 2012; 62 (4): 1385- 94. (14) Fonseca AP., Sousa JC. Effect of antibiotic- induced morphological changes on surface properties, motility and adhesion of nosocomial Pseudomonas aeruginosa strains under different physiological states. Journal of Applied Microbiology 2007; 103 (5): 1828- 37. (15) Rowan NJ. Viable but non- culturable forms of food and waterborne bacteria: Quo Vadis? Trends in Food Science & Technology 2004; 15 (9): 462- 7. (16) McDougald D., Rice SA., Weichart D., Kjelleberg S. Nonculturability: adaptation or debilitation? FEMS Microbiology Ecology 1998; 25 (1): 1- 9. (17) Oliver JD. Recent findings on the viable but nonculturable state in pathogenic bacteria. FEMS Microbiology Reviews 2010; 34 (4): 415- 25. (18) Kana BD., Mizrahi V. Resuscitation- promoting factors as lytic enzymes for bacterial growth and signaling. FEMS Immunology & Medical Microbiology 2010; 58 (1): 39- 50. (19) Jørgensen F., Bally M., Chapon- Herve V., Michel G., Lazdunski A., Williams P., et al. RpoS- dependent stress tolerance in Pseudomonas aeruginosa. Microbiology 1999; 145 (4): 835- 44. (20) Sang- jin Suh ls- S.,Donald E. Woods., Daniel J. Hassett., Susan E. H. west., Dennis E. Ohman. Effect of rpoS Mutation on the Stress Response and Expression of Virulence Factors in Pseudomonas aeruginosa. Journal of Bacteriology 1999; 181:3890- 7. (21) Tyler SD., Strathdee CA., Rozee KR., Johnson WM. Oligonucleotide primers designed to differentiate pathogenic pseudomonads on the basis of the sequencing of genes coding for 16S- 23S rRNA internal transcribed spacers. Clinical and diagnostic laboratory immunology 1995; 2 (4): 448- 53. (22) Matthew R., Fogle BS., John A. Griswold M. D., Jeffrey W. Oliver M. D., Abdul N., Hamood Ph. D. Anti- ETA Igg Neutralizes The Effects of Pseudomonas Aeruginosa Exotoxin A. Journal Of Surgical Research 2002; 106: 86- 98. (23) Dworkin J. Form equals function? Bacterial shape and its consequences for pathogenesis. Molecular Microbiology 2010; 78:792- 5. (24) Oliver JD. The viable but nonculturable state in bacteria. Journal of Microbiology. 2005; 43 (1): 93- 100. (25) Faghri J., Poursina F., Moghim S., Esfahani HZ., Esfahani BN., Fazeli H., et al. Morphological and Bactericidal Effects of Different Antibiotics on Helicobacter pylori. Jundishapur Journal of Microbiology 2014; 7 (1): 1- 7. (26) Besnard V., Federighi M., Cappelier J. Evidence of Viable But Non- Culturable state in Listeria monocytogenes by direct viable count and CTC- DAPI double staining. Food microbiology 2000; 17 (6): 697- 704. (27) Sedighi M., Ghasemian safaie H., Vaez H., Moghoofeie M., Hadifar SH., Oryan G., et al. Detection of blaSPM-1 metallo-β-lactamase gene in Imipenem-resistant Pseudomonas aeruginosa strains isolated from hospitalized patients in Isfahan hospitals. Biological Journal of Microorganism 2015; 13 (1): 1- 14. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,017 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 607 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||